人 S100 鈣結(jié)合蛋白 A4（S100A4）是 S100 蛋白家族的重要成員，因能與鈣離子結(jié)合而得名。其基因定位于人類特定染色體上，編碼的蛋白質(zhì)由特定數(shù)量的氨基酸殘基組成，分子結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè) EF-hand 鈣結(jié)合結(jié)構(gòu)域，這是其發(fā)揮功能的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

S100A4 在人體多種組織和細(xì)胞中均有表達(dá)，尤其在成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞等中較為常見。在正常生理狀態(tài)下，S100A4 的表達(dá)水平維持在一定范圍，參與機(jī)體的多種生理過程。而在病理狀態(tài)下，如腫瘤發(fā)生發(fā)展、炎癥反應(yīng)、纖維化疾病等，其表達(dá)水平會(huì)出現(xiàn)顯著異常。例如，在多種惡性腫瘤（如乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌等）中，S100A4 常常高表達(dá)，且與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移、預(yù)后不良等密切相關(guān)，因此成為腫瘤研究和臨床診斷中的重要生物標(biāo)志物。

生理功能

S100A4 在人體中具有多樣的生理功能，涉及細(xì)胞的多種生命活動(dòng)調(diào)控。

首先，參與細(xì)胞遷移和侵襲。S100A4 可以通過與細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白（如肌動(dòng)蛋白、微管蛋白等）相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的重組，從而影響細(xì)胞的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)能力。在腫瘤細(xì)胞中，高表達(dá)的 S100A4 能增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散。

其次，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡。S100A4 能夠通過激活或抑制特定的信號通路（如 MAPK、NF-κB 等），參與細(xì)胞增殖和凋亡的調(diào)控。在不同的細(xì)胞類型和生理病理狀態(tài)下，其對細(xì)胞增殖和凋亡的影響可能不同，例如在某些腫瘤中，它可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖并抑制其凋亡，從而有利于腫瘤的生長。

此外，參與炎癥反應(yīng)。S100A4 可以作為一種促炎因子，在炎癥部位釋放后，與免疫細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激活免疫細(xì)胞，促進(jìn)炎癥因子（如 IL-6、TNF-α 等）的釋放，放大炎癥反應(yīng)。同時(shí)，它也可能在炎癥的修復(fù)過程中發(fā)揮一定作用。

同時(shí)，S100A4 還與組織纖維化相關(guān)。在肝纖維化、肺纖維化等疾病中，S100A4 可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的活化和增殖，增加膠原蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)的合成，加速纖維化進(jìn)程。

檢測原理

人 S100 鈣結(jié)合蛋白 A4（S100A4）ELISA 試劑盒是基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）原理，專門用于定量檢測人樣本（如血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)液等）中 S100A4 含量的專業(yè)檢測工具。

該試劑盒的檢測原理以抗原與抗體的特異性結(jié)合為核心，具體檢測流程如下：試劑盒中的酶標(biāo)板預(yù)先包被了針對人 S100A4 的特異性單克隆抗體。當(dāng)加入待檢測的人樣本時(shí)，樣本中的 S100A4 會(huì)與酶標(biāo)板上包被的抗體發(fā)生特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物，這一過程通常在 37℃下孵育一定時(shí)間，以保證結(jié)合充分。

孵育結(jié)束后，進(jìn)行洗滌步驟，將未與包被抗體結(jié)合的其他雜質(zhì)清洗去除，避免干擾后續(xù)檢測。接著，向酶標(biāo)板中加入酶標(biāo)記的抗人 S100A4 多克隆抗體（常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶），該酶標(biāo)抗體可與已結(jié)合在包被抗體上的 S100A4 發(fā)生特異性結(jié)合，形成 “包被抗體 - S100A4 - 酶標(biāo)抗體" 的夾心結(jié)構(gòu)。再次孵育后，進(jìn)行洗滌以去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。

隨后，加入底物溶液（如 TMB 底物液），酶標(biāo)抗體上的酶會(huì)催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，生成有色產(chǎn)物。顯色反應(yīng)的強(qiáng)度與樣本中 S100A4 的含量呈正相關(guān)，即樣本中 S100A4 含量越高，顯色反應(yīng)越強(qiáng)烈，顏色越深。

最后，加入終止液（如硫酸溶液）終止反應(yīng)，此時(shí)反應(yīng)液顏色會(huì)發(fā)生變化（通常由藍(lán)色變?yōu)辄S色）。使用酶標(biāo)儀在特定波長（一般為 450nm）下測定各孔的吸光度（OD 值）。根據(jù)試劑盒提供的 S100A4 標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待檢測樣本的 OD 值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比，即可計(jì)算出樣本中 S100A4 的具體含量，從而為相關(guān)疾病的研究、診斷和治療監(jiān)測提供依據(jù)。